一、目的
正确使用倒置显微镜对细胞标本的形态特征进行观察,为生命科学的研究提供更多可靠的实验数据。
二、原理
倒置显微镜系统(IX71系列)是在透镜成像原理基础上发展起来的显微观察系统,利用卤素灯为光源,光线经过聚光镜汇聚后透过标本,通过物镜对标本进行聚焦放大成像,最后通过目镜把物镜所成的像再次放大,从而使实验者能够清晰的分辨体外培养的细胞的形态以及内部结构,主要用于体外活细胞培养形态观察,根据实验需求配置了明场、暗场、相差、荧光等技术模块。
三、主要操作规程
明场观察:
1、打开透射光主开关(TH4);
2、转动荧光激发块转盘(IX2-RFAC)使未装入激发块的位置进入光路(荧光激发块转盘转到“3”、“4”、“5”或者“6”的位置);
3、聚光镜转盘(IX2-ULWCD)转到“BF”位置,直到听到咔嗒声;
4、转动物镜转盘,选用合适的物镜,调节灯的强度直至合适的强度,按需要选择合适的滤镜,调焦观察。
相衬观察(PH)观察:
1、打开透射光主开关(TH4);
2、转动物镜转盘,选用合适的物镜;
3、转动聚光镜转盘(IX2-ULWCD),使相衬光学元件与所用物镜相匹配(例如,用4X物镜,则转到“PhL”位置;用10X物镜,则转到“Ph1”位置;如用20X物镜,则转到“Ph1”;40X物镜,则转到“Ph2”),直到听到咔嗒声;
4、调节灯的强度直至合适的强度,按需要选择合适的滤镜,例如,在光路中插入绿色干涉滤色片(43IF550-W45)会改善反差,调焦观察。
倒置IX71显微镜透射光明场观察步骤
观察相差时,要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。
相差元件(聚光镜内) |
PHL |
PH 1(PH C) |
PH 2 |
物镜 |
4倍 |
10倍、20倍 |
40倍、60倍 |
虚线框内第一次观察调整完成后不需要进行调整,除非更换相差光学元件。
倒置显微镜IX71荧光观察方法步骤
荧光观察应遵循先明场对标本定位,然后再转入荧光观察的顺序。